Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Микоплазмы. Образец объемом 10 мл должен выдерживать испытание на микоплазмы (2.6.7).
Микобактерии (2.6.2). Образец объемом 5 мл подвергают испытания на наличие Mycobacterium spp. методами культивирования, обладающими известной чувствительностью в отношении определения этих организмов.
Испытание клеточной культуры на другие посторонние агенты. Нейтрализованные образцы, эквивалентные 500 человеческим дозам, но не менее 50 мл, если иные количества не предписаны в частной статье, испытывают на присутствие посторонних агентов путем введения в непрерывные почечные обезьяньи и человеческие клеточные культуры. Если вирус выращен на человеческих диплоидных клетках, нейтрализованный вирусный сбор также испытывают на отдельной культуре диплоидных клеток. Если вирус вакцины выращен не на человеческой либо обезьяньей клеточной системе, то производят также инокуляцию клеток данного вида из отдельной партии. Клетки инкубируют при температуре
36±10С и наблюдают в течение 14 дней. Вирусный посевной материал или сбор выдерживает испытание, если ни в одной из клеточных культур не обнаруживается признаков любых посторонних агентов, не внесенных в результате случайной контаминации. Результаты испытания считают достоверными, если не менее 80% клеточных культур остаются жизнеспособными.
Птичьи вирусы (требуется только для вирусов, выращенных на тканях птичьего происхождения). Нейтрализуют образец, эквивалентный 100 человеческим дозам, но не менее 10 мл. Используя по 0,5 мл на каждое яйцо, инокули-руют группу оплодотворенных яиц SPF возрастом от 9 до 11 дней аллантоисным путем, а другую группу, возрастом от 5 до 7 дней, - в желточный мешок. Инкубируют в течение 7 дней. Вирусный посевной материал или сбор выдерживает испытание, если в аллантоисных жидкостях и жидкостях желточных мешков не обнаруживаются гемагглютинирующие агенты и если ни один из эмбрионов и хорио-аллантоисных мембран не обнаруживает макроскопической патологии. Результаты испытания считают достоверными, если не менее 80% привитых яиц выживают в течение 7 дней.
ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ КЛЕТОЧНАЯ КУЛЬТУРА: КОНТРОЛЬНЫЕ КЛЕТКИ
Контрольные клетки изучают под микроскопом на отсутствие любой цитопа-тической дегенерации вирусного происхождения. Изучение проводят в течение периода инкубации, но не менее, чем в течение 14 дней после инокуляции. Результаты испытания считают достоверными, если не менее 80% контрольных клеточных культур выживают в течение периода наблюдения.
В момент последнего сбора вирусов, но не ранее, чем на 14-й день, выполняют нижеописанные испытания.
Испытание на гемадсорбирующие вирусы. Не менее 25% контрольных культур испытывают на наличие гемадсорбирующих вирусов путем добавления эритроцитов морских свинок. При необходимости, эритроциты морских свинок можно хранить при температуре 5±30С в течение не более 7 дней. Состояние половины культур оценивают после инкубации при температуре 5±30С в течение 30 минут, а состояние другой половины - после инкубации при температуре от 20 до 250С в течение 30 минут. Признаков присутствия гемадсорбирующих агентов не должно обнаруживаться.
Испытание клеточных культур на другие посторонние агенты. Собирают супернатанты контрольных клеток и испытывают на присутствие посторонних агентов путем введения в почечные обезьяньи и человеческие клеточные культуры. Если вирус вакцины выращен не на человеческой или обезьяньей клеточной системе, то производят также инокуляцию клеток данного вида, но из отдельной партии. На каждой клеточной системе испытывают не менее 5 мл. Инокулирован-ные культуры инкубируют при температуре 36±10С и наблюдают в течение 14 дней. Признаков присутствия посторонних агентов не должно обнаруживаться.
Если производственная клеточная культура поддерживается при температуре, отличной от 36±10С, выполняют дополнительное испытание на посторонние агенты при этой температуре с использованием клеток того же типа, который используется для выращивания вируса.
КОНТРОЛЬНЫЕ ЯЙЦА
Гемагглютинирующие агенты. По 0,25 мл аллантоисной жидкости каждого из яиц испытывают на гемагглютинирующие агенты путем непосредственного смешивания с куриными красными кровяными тельцами и после засева яиц SPF,
выполняемого следующим образом: инокулируют объединенный образец амниотических жидкостей общим объемом 5 мл в аллантоисную и амниотическую полости яиц SPF. Объемы введения - по 0,5 мл. Контрольные яйца выдерживают испытание, если ни в одном случае не обнаруживаются признаки присутствия ге-магглютинирующих агентов.
Вирусы птичьего лейкоза. Используют образец объединенных амниотических жидкостей контрольных яиц общим объемом 10 мл. Проводят усиление путем пяти пассажей на клеточных культурах куриных эмбрионов, не содержащих вирусов лейкоза; испытание на птичий лейкоз выполняют с использованием клеток, полученных в пятом пассаже. Контрольные яйца выдерживают испытание, если не обнаруживается признаков присутствия вирусов лейкоза.
Другие посторонние агенты. Образцы объединенных амниотических жидкостей контрольных яиц по 5 мл прививают на человеческие и обезьяньи клеточные культуры. Клеточные культуры наблюдают в течение 14 дней. Контрольные яйца выдерживают испытание, если не обнаруживается признаков присутствия посторонних агентов. Результаты испытания считают достоверными, если не менее 80% привитых культур выживают до окончания периода наблюдения.
